Multiplex-quantitative PCR (qPCR) hat sich zu einer Schlüsseltechnologie der modernen Molekularbiologie entwickelt und ermöglicht die gleichzeitige Detektion und Quantifizierung mehrerer genetischer Targets innerhalb einer einzigen Reaktion. Diese Präsentation beleuchtet die praktischen Herausforderungen und Möglichkeiten der Multiplex-qPCR und zeigt, wie moderne Instrumentierung in Kombination mit automatisierten Liquid-Handling-Lösungen die Robustheit, den Durchsatz und die Reproduzierbarkeit von Assays deutlich verbessern kann.

Zu Beginn werden die Grundlagen von PCR und qPCR vorgestellt, einschließlich fluoreszenzbasierter Detektionsmethoden, verschiedener Assay-Chemien sowie der analytischen Vorteile von Multiplex- gegenüber Singleplex-Ansätzen. Dabei werden Vorteile wie geringerer Reagenzienverbrauch, höhere Informationsdichte, verbesserte Effizienz und gesteigerter Probendurchsatz erläutert. Gleichzeitig werden typische Herausforderungen wie spektrale Überlagerungen, Primer-Konkurrenz, Assay-Optimierung und Crosstalk zwischen Fluoreszenzkanälen thematisiert.

Anhand unseres qTOWER iris zeigen wir Lösungsmöglichkeiten dank eines patentierten faseroptischen Detektionssystems, eines breiten Spektralbereichs von UV bis NIR, werkseitig kalibrierter optischer Effizienz, individueller Gain-Einstellungen sowie integrierter Color-Compensation-Technologie ermöglicht das System die zuverlässige simultane Detektion von bis zu sechs Targets bei gleichzeitig minimiertem Risiko falsch-positiver Signale durch spektrale Überlagerungen. Anwendungsbeispiele umfassen unter anderem den Nachweis gentechnischer Veränderungen in Lebens- und Futtermitteln, die Analyse humaner DNA-Targets, Pathogendetektion sowie Genexpressionsanalysen.

Darüber hinaus zeigen wir, wie automatisiertes Liquid Handling mit dem CyBio FeliX System qPCR-Workflows optimiert, indem manuelle Pipettierfehler reduziert, die Reproduzierbarkeit erhöht und flexible Hochdurchsatz-Probenvorbereitung ermöglicht werden. Modulare Pipettierköpfe, skalierbare Automatisierungskonzepte und die hohe Anpassungsfähigkeit an verschiedenste Laboranwendungen machen das System besonders geeignet für Genomik-, Diagnostik-, NGS- und pharmazeutische Forschungsworkflows.

Insgesamt verdeutlicht die Präsentation, wie die Kombination aus fortschrittlicher Multiplex-qPCR-Technologie und intelligenter Laborautomation effiziente, skalierbare und hochreproduzierbare molekularbiologische Workflows für Forschung, Diagnostik, Lebensmittelanalytik und Life-Science-Anwendungen ermöglicht.